各位老瑞氏-吉姆萨染色如果用浸染的方式应该怎么操作呢

手工步骤是 ①滴加姬姆萨染色液A液（0.5〜0.8ml）于涂片上，并让 染液覆盖整个标本涂片染色1分钟；②将姬姆萨染色液B 液滴加于A液上面（滴加之量为A液的2 ~3倍）以洗耳球吹出 微风使液面产生涟漪状，使两液充分混合，染色3〜10分钟； ③水洗（冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣 沉淀在标本上）；④干燥，镜检。你要浸染的话可以取一部分AB液出来，这样不怕污染母液

是的，是先滴A液然后水洗再染B液。

操作步骤：

1.滴加瑞氏吉姆萨A液(约0.5ml-0.8ml)涂片上，并让染液覆盖整个标本染色1min；

2. 再将瑞氏吉姆萨B液加于A液上面（滴加量为A液的2-3倍），以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状，使两液充分混合，染色3-10min。（染血片时间可略短，染骨髓片时间应视细胞量多少而异）

3.水洗（冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣沉淀在标本上），干燥、镜检。

瑞氏-吉姆萨染色采用双染色法,需要先后使用两种染色试剂:A液(瑞氏黄)和B液(吉姆萨注射荧光色素)。如果采用浸染的方式,操作过程应如下:

1. 先用A液(瑞氏黄染色液)染色,并水洗干净。这一步染色了所有细胞蛋白质,需要水洗以除去多余的A液。

2. 然后再用B液(吉姆萨注射荧光色素)染色。这一步只染色一些特定的细胞成分,如果不先水洗干净A液,会导致B液被污染,影响染色效果。

3. 如果A液和B液在载玻片上混合,需要严格控制其比例,否则也会影响染色效果。而在试剂缸中进行浸染,A液和B液很难混合到适当的比例,所以不推荐。

4. A液染色结束后需及时水洗,否则其染色效果会持续增加,影响B液染色效果。

所以,瑞氏-吉姆萨染色如果采用浸染法,正确的操作过程应为:

1) 用A液(瑞氏黄)染色

2) 水洗干净

3) 用B液(吉姆萨荧光色素)染色

4) 最后密封载玻片进行观察

在这个过程中,A液染色结束后及时用 distilled water 水洗是关键一步。如果不水洗直接用B液染色,会导致B液被A液污染,从而产生交叉染色效果,染色图片难以判读。另外,也不推荐在试剂缸中采用简单的混合A液和B液的方式进行染色,这无法保证两种染色液的比例适当,很可能导致染色效果受影响。

所以,瑞氏-吉姆萨染色采用浸染法时,应严格按照先A液染色、水洗、后B液染色的顺序进行,这是保证获得理想染色效果的关键。