如何很好地去染膜蛋白的免疫荧光？怎么保证染到的只是膜蛋白？

在洗涤过程中，一要注意动作轻柔，固定后的细胞比较脆弱，如果太过大力，很容易把细胞吹洗掉，二是洗涤时间要把握好，每次洗涤5min左右，三是切忌不要干片，即吸掉溶液后不要把细胞干着，不然容易造成背景着色。

一般染膜蛋白要使用好一点的抗体

一方面是确保使用膜特异抗体进行免疫荧光染色，另外一方面是做好相应的阴性对照来减少非特异性荧光筛选

---一般像Di系列的膜染料，都是非共价标记膜，但是随着时间的延长，膜的流动会将染料带到细胞内。所以最好是找到只在膜表面表达蛋白，使用抗体标记的方法进行成像。