【求助】原代神经元第五天开始大量死亡

凝望太阳的向阳花

2023-04-24

养原代好几个月了，一开始还好，长得挺好的，最近几次提，总是在第五天左右的时候出现死亡细胞增多，有很多小圆点点，第7天就大量死亡了，不知何故，也有按时半量换液，也没有被污染的情况，用的Neurobasal+2%B27+1%双抗。请问各位同道是否有什么经验？

橙汁儿青柠味

2023-04-24

有帮助

细胞状态不好，并且出现一些黑点可能是有支原体污染

loveliufudan

2023-04-24

有帮助

以下是一些建议，希望能对你有所帮助：

检查细胞密度：播种细胞时，细胞密度过高或过低都可能导致细胞死亡。尝试调整细胞播种密度以找到适合的条件。

检查培养基成分：确保Neurobasal、B27和双抗等成分的质量和浓度适用于你的实验系统。可以考虑更换新鲜的培养基成分，或尝试使用其他神经元专用培养基。

检查细胞生长环境：确保细胞生长环境（如温度、湿度和气氛）恒定且适宜神经元生长。细胞培养器要避免剧烈震动和光照。

balalaLy

2023-04-24

有帮助

培养基添加500uM 的L-glutamine试一下

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