sswei
1、培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子
通常情况下,当购买细胞,并没有按照ATCC或国内细胞库推荐的方法制备培养基,使用实验使用的培养基来培养细胞。解决方法一般是按照推荐的方法制备培养基,或直接购买培养细胞的培养基。
2、支原体、细菌、真菌等污染:虽然培养基中通常添加双抗体(青霉素和链霉素),但如果无菌操作观念不强,仍有可能造成污染。处理方法:如果有冷冻细胞,可以丢弃污染细胞。当然,丢弃并不是随意的,扔进垃圾桶。应按照实验室生物安全规定进行。然后复苏培养物,建议培养箱完全消毒。如果不冷冻,而且这种细胞非常珍贵,常用的方法是药物:细菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染加抗真菌药物;支原体污染再加上抗支原体药物。
3、许多细胞的生长依赖于密度。如果传代后细胞密度过小,也会影响细胞生长。这段时间没有什么特别好的,就是更换液体。如果细胞培养瓶为T75,则可以消化、离心、复苏,然后接种到T25瓶中。
4、换液间隔时间太长。在这种情况下,细胞培养瓶中积累了大量的细胞代谢废物,影响细胞活性。推荐:勤奋点!
5、细胞的“消化”时间不宜过长,减少对细胞的损伤;此外,EDTA一般添加到胰腺酶中,螯合钙离子,影响细胞粘附。治疗方法:控制细胞“消化”时间,尽量去除干净的胰蛋白酶和EDTA。
土井挞克树
可能是细胞状态不好或者细胞老化了,可以添加血清再养养看
loveliufudan
HepG2细胞长不起来的原因可能有很多,下面列举一些可能的原因和对应的解决办法:
细胞密度不够:细胞密度太低会导致细胞生长缓慢。建议在培养细胞时,将细胞密度控制在适当范围内,避免过于稀释。
细胞质量不好:如果细胞质量不好,也会影响细胞生长。可以尝试更换新的细胞株或者培养条件。
细胞培养条件不适宜:HepG2细胞对培养条件比较敏感,需要提供适宜的营养物质和环境条件。建议优化培养基配方,控制培养环境的温度、湿度等因素。
染色体异常:HepG2细胞常常具有染色体异常,可能导致细胞生长受限。可以尝试使用新的细胞株。
感染:细胞感染也会导致细胞生长缓慢,需要注意细胞的消毒和防护。
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