dxy_y73o3od5
用含有2% FBS的F12-k培养基培养A549,做细胞划痕实验(6孔板,200μl枪头划痕),对照组是在培养液里面加2μl的DMSO(2ml培养基),但是24h后,细胞没有迁移,把血清浓度提高到8%,也是一样的结果,有哪位大神能够解答一下吗?
墨幽染染
划痕实验很重要的一个因素就是铺板量,不同细胞的大小不一样,铺板量不一样。就像786-O细胞比较大,96孔板一般铺2-3万细胞/每孔,第二天细胞融合度达到90%以上;而RKO细胞比较小,96孔板一般需要铺7-8万/每孔,第二天细胞融合度差不多达到90%左右。所以具体要根据细胞大小适当调整,细胞划痕铺板密度一般为70-90%之间。密度过低,增殖因素可能会影响迁移能力,反之,对于细胞状态会有影响,以至于不能保证实验的客观真实性。
loveliufudan
在细胞划痕实验中,细胞的迁移能力会受到多种因素的影响,包括培养基成分、血清浓度、细胞密度、划痕的宽度和长度等。针对您的实验情况,以下是一些可能的原因和解决方法:
细胞密度太低:细胞密度过低可能会影响细胞的迁移能力。您可以尝试增加初始的细胞密度,以提高细胞的迁移能力。
划痕的宽度和长度过小:划痕的宽度和长度越小,细胞的迁移能力越弱。您可以尝试增加划痕的宽度和长度,以促进细胞的迁移。
培养基成分不适合细胞:不同的细胞需要不同的培养基成分,否则会影响其生长和迁移能力。您可以尝试使用其他适合A549细胞的培养基,例如DMEM/F12。
balalaLy
不同的细胞可能对血清要求不一样,可以适当调整一下血清浓度
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