土井挞克树
密度还算正常,可以再培养看看,或者增加血清营养。
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状态还可以,建议以后每天加入2ml的新鲜 BMDM 培养基。长至第7天成熟。(若使用低吸附培养皿,最好裂红,因为macrophage 不易贴壁,会有很多细胞悬浮,不裂红,红细胞会影响 macrophage 生长。而使用高吸附培养皿,在第4天换液时会把红细胞一起除去),第7天,BMDM完全成熟,用胰酶消化1分钟,然后吹下细胞,计数后2-3x106个/m铺板做 western。1-2x106个/ml 铺板。
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BMDM(骨髓源巨噬细胞)的密度和形态通常与细胞培养的条件和时间有关,因此在第5天仍然呈现圆形是正常的。
如果您对细胞的生长情况感到担忧,可以检查以下几个方面:
细胞数量:检查细胞数量是否增加或减少。如果细胞数量有明显变化,可能需要重新评估培养条件或处理方法。
细胞健康状况:观察细胞的健康状况,包括细胞颜色、大小和形状是否正常,有无异形、空泡等异常现象。
细胞功能:评估细胞是否具有预期的功能。例如,对于巨噬细胞,可以测试它们的吞噬作用、分泌物质等。
液体更换:液体更换的频率也是影响细胞生长的重要因素之一。如果是第4天换的液,可能需要考虑更频繁的液体更换。
需要注意的是,对于特定的实验和应用,细胞密度的要求和标准可能不同。因此,建议结合具体实验要求和经验来评估细胞的生长情况。
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