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小鼠脑片 Nav1.6 染色

相关实验:细胞免疫荧光

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olaf闰闰

样本:小鼠海马冠状切片

一抗:Anti-Nav1.6/SCN8A抗体(ab65166) 1:400

二抗:Mouse-488 1:500


流程:

-80 保存的切片,室温下放置 15min 后放入烘箱中。

37℃ 烘干 15min。室温下 PBST 洗 3 次,每次 8min ,然后放入 0.3% H2O2 洗。15min (30% H2O2 400ul+PBS 40ml)。将片子置于柠檬酸钠工作液进行抗原修复。冷却至室温。用 PBS 洗三次,每次 8min。用 2%BSA 室温封闭一小时,4℃孵育。一抗过夜,次日 PBST 洗一次,每次 8min,PBS 洗三次,每次 8min,然后用 2%BSA。

配荧光二抗。避光在室温下孵育二抗一小时,用 PBST 洗一次,每次 8min,PBS。

洗三次,每次 8min,,使用 DAPI 染细胞核,PBST 洗一次,每次 8min,PBS。

洗三次,每次 8min,抗荧光衰减封片剂封片,荧光显微镜拍照。

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1 个回答

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实验小助理静静

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