质粒浓度低

你这50ml不会是在50ml管里，封死管口直接摇的吧？感觉是你菌量不够

　1、增加收菌次数,相对提高了质粒的量,这样的话裂解液的量可以适当增加；

　　2、裂解要充分,变性和复性按说明应该是不超过5分钟,合理控制时间,一般在3分到4分半的时间都是可以的；

　　3、过柱子时,吸附的时间尽量长一些,可以在这期间做做其他实验或者吃个饭什么的；

　　4、如果没有必要,不使用去蛋白液,因为每过一遍柱子,其损耗越大,不过这得根据说明的菌种而定；

　　4、最后洗脱回收的时候,要单方面提高浓度,就要适当减少洗脱液的量,我一般都是回收到40~50 μL的,同时要增加洗专脱次数,一般两三次足矣.

　　如果以上方法都用遍了还无效,就应该考虑菌种本身的问题,是不是冻融或者传代次数过高,导致质粒本身丢失

质粒的浓度过低的话，可能有几个原因。首先你裂解要充分,变性和复性按说明应该是不超过5分钟,合理控制时间,一般在3分到4分半都行。然后你过柱子时,吸附的时间尽量长一些。