下面是我复苏细胞的一些经验,不知可否对你有所帮助。
1、在复苏细胞前,调好水浴锅温度至37度,并保持恒温,检查离心机的转速(900rpm)与时间(4min)。
2、在超净台中,准备好无菌离心管、吸管及培养基等必需的无菌用品。
快速移到37度恒温水浴锅中,并同时摇动冻存管,以加速溶解(注意:此步中,冻存物溶解所用的时间越短越好,但是水浴锅温度一定恒定为37度)。
4、待冻存物溶解后,将其转移至10ml无菌离心管中,加入9ml的完全培养基,轻轻吹匀,密封,于900rpm离心4min。
5、离心 后,弃去上清液,加入培养基,轻轻吹打均匀,之后,将其转移至培养瓶中,均匀铺满培养瓶底,放入培养箱中,12小时后,再观察细胞的贴壁状况(注意:刚复苏的细胞在12小时内最好不要频繁地从培养箱中取出观察,反反复复地取出观察不利于细胞的贴壁,刚消化分瓶的细胞也是如此)。
在冻存细胞前,还有一些准备工作要做,把该准备的东西都准备好,这样冻存时就会不