见不到荧光是为什么？

呜咽

2013-08-22

做细胞双标免疫荧光，单独用红色的二抗都能染出所要的指标，由于要检测两个指标是否有共定位，需要选择另一种颜色的荧光二抗，转染后的细胞自带绿色荧光，于是选了蓝色的二抗，以上指标再用此二抗均未见荧光，实在很苦恼，试过多种办法，均无法作出满意的结果，毕业在即，继续有大侠指点迷津，谢谢！

zhangwan8686

2013-08-22

有帮助

主要问题是抗体浓度和一抗二抗结合不够，尝试提高二抗浓度，延长二抗反应时间，另外，一抗可以做梯度实验，找寻一抗二抗最佳比例

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