噬菌体电镜

需要进行醛类灭活，可以使用邻苯二甲醛

1、收集培养好的新鲜菌体，用1×PBS（pH7.0）或0.9%NaCl漂洗样品2-3 次，每次15min，5000rpm离心3min，去上清。

2、加2.5%的戊二醛溶液1ml，轻摇充分混匀，重悬菌液，4℃固定4h或过夜

3、5000rpm离心3min后去上清，加入500ul PBS漂洗样品三次，每次15min （可用枪轻轻吹打，然后离心再加入新鲜PBS，混匀离心）

4、加1%俄酸500ul或适量，摇动充分混匀，固定1-2h∶

5、5000rpm离心3min，去上清，加入PBS500ul漂洗样品三次，每次15min；

6、用梯度浓度（包括20%，50%，80%，100%五种浓度）的乙醇溶液脱水，每种浓度处理10min，5000rpm离心3min∶

7、用纯丙酮或100%叔丁醇转换100%乙醇2-3次，即乙醇菌液离心的后，去上清，加200ul纯丙酮4℃放置20-30min，5000rpm离心3min，再加入新鲜纯丙酮。

8、自然风干，密封4℃保存，等待上样。

制备样本过程中需要用醛类溶液灭活。

噬菌体电镜样品制备的确切方法可能会因实验目的、噬菌体类型和实验室的惯例而有所不同。以下是一种常见的噬菌体电镜样品制备方法，其中包括醛类溶液的使用：

1. 噬菌体培养和扩增：首先，培养和扩增所需的噬菌体株，使用适当的培养基和条件。噬菌体扩增通常需要使用感染宿主细菌进行感染。

2. 噬菌体精炼：将培养液通过低速离心等方式进行精炼，以去除细菌细胞和其他细胞碎片。这样可以获取相对纯净的噬菌体悬液。

3. 醛固定：为了固定噬菌体样本，一般会使用醛类溶液。常见的醛类溶液包括2.5%至4%的戊二醛（glutaraldehyde）或2%的甲醛（formaldehyde）。选择适当的醛类溶液浓度取决于实验需求和噬菌体的特性。固定时间一般为30分钟至1小时。

4. 洗涤：固定噬菌体后，用缓冲液或PBS（磷酸盐缓冲液）等洗涤样本，以去除多余的固定剂。

5. 后续处理：根据需要，可以进行进一步的样品处理步骤，如后续固定、去水化和染色等。