菠萝凤梨
老师们好,我有个腺病毒包装问题要请教一下。用的Ad-Easy系统,前年成功包出来两个,但是最近293A细胞状态不好,可能代数偏高或者冻存时间太长了,常常转染4天左右就培养液黄,细胞支持不住就成片状飘起,这种情况可以怎么补救一下呢?是否只能重新购入293A细胞呢?
Dr_劉医生
试试在传代前检测一下细胞活性,不行的话只能重新购入细胞株
loveliufudan
可以尝试以下方法进行补救:
尝试降低转染的细胞密度,减少对细胞的损伤,提高细胞存活率;
选用更加新鲜的细胞株,避免细胞的代数过高或者冻存时间过长;
尝试优化腺病毒包装的条件,例如改变转染剂的种类和浓度、调整包装质粒的浓度、改变感染时间和感染剂量等;
检查病毒包装系统的各个组成部分是否存在问题,例如检查质粒是否有突变、检查包装质粒和载体的配比是否合适等。
毛利小五郎的徒弟
可能是冻存的时间长了,可以缓慢复温少量培养看看,如果状态还是不好建议更换
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