有没有做法夫酵母实验的大佬啊，交流一下外源基因整合。

你导进去了吗，我也是做法夫酵母的，可以交流一下吗？

调整一下质粒吧，rna的效果不好，建议应用质粒转导。

外源DNA片段过长会导致DNA重组失败，因为外源DNA片段与载体分子有个适宜的比例：1：5-1:10。其他的，如果操作步骤控制不好，控制的温度不适宜，也会导致失败。

我可以给您提供一些关于外源基因整合到酵母细胞中的一般步骤和一些可能会影响到转化效率的因素。希望对您有所帮助。

一般步骤：

构建表达载体：将外源基因克隆到适当的表达载体上，如pYES2.0、pESC-URA、pGREG等。

制备质粒DNA：将表达载体扩增后，纯化质粒DNA。

转化酵母细胞：将质粒DNA通过电穿孔法或化学转化法转化入酵母细胞中。

选择和鉴定：将转化后的酵母细胞进行筛选和鉴定，如生长选择性培养基，PCR，Western blot等方法。

影响转化效率的因素：

酵母菌株：不同的酵母菌株对于外源基因的转化效率可能会有所不同，需要选择适合的菌株进行转化。

质粒DNA：质粒DNA的质量和纯度对转化效率有很大的影响，应该采用高质量的DNA。

转化条件：转化的条件，如电穿孔的电压和时间、化学转化的化学品和浓度等，也会影响转化效率。

转化前的处理：转化前的酵母细胞处理，如生长阶段、预处理和洗涤等也可能会影响到转化效率。

外源基因的性质：外源基因的长度、GC含量、序列结构等也可能会影响到转化效率。

对于您提到的rDNA介导的基因整合，可以考虑选择适合的酵母菌株和合适的rDNA位点，使得外源基因整合到rDNA上，并且使用高质量的质粒DNA和合适的转化条件来提高转化效率。此外，可以采用筛选和鉴定等方法来验证转化效率和外源基因整合的结果。