有做适配体连接细菌的友友吗？

我也在做这方面，试了很久还是连不上，您现在有解决方案了吗

你可以加一些促连剂，可以起到类似催化剂的作用，促进连接。

主要考虑如下原因：

1.同源臂设计太短了，不要少于28bp。

2.根据同源重组酶的说明书确定是否是Vector量太高了，调整连接比例。

3.再次确认需要连接的片段大小是否正常，有可能是一开始PCR的模板就有问题，建议模板测序。

4.根据酶的说明书，适当延长连接时间。

5.平板不长菌也可能是质粒毒性太高了，不利于大肠杆菌生长。降低培养温度，或者重新设计质粒降低毒性。

6.换用更好用的感受态细胞。

取决于你是怎么测的适配体和细菌的结合实验呢？用流式测，就会出现找不到结合细菌数的问题，可以试试用荧光法来侧适配体的浓度。