废柴7号
今天看到一个用辅助噬菌体侵染TG1用PEG沉淀进行扩增 这种方法和用双层琼脂板进行扩增有什么区别
sswei
可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散,二者相遇,在比例合适处形成白色沉淀。双向琼脂扩散试验(Double immunodiffusion test) 抗原和抗体加到琼脂板上相对应的孔中,两者各自向四周扩散,如两者相对应,浓度比例合适,则经一定时间后,在抗原、抗体孔之间出现清晰致密的白色沉淀线。每一抗原与其相对应抗体只能形成一条沉淀线,若同时含有若干对抗原抗体系统,因其扩散速度的不同,可在琼脂中出现多条沉淀线。且根据沉淀线融合情况,还可鉴定两种抗原是完全相同还是部分相同。所以,可用此法来分析和鉴定标本中多种抗原或抗体成份,并用以测定抗原或抗体的效价。
PEG能够沉淀蛋白质,而噬菌体(包括病毒),外壳都含蛋白。所以利用PEG沉淀的功能,将噬菌体颗粒从溶液中沉淀下来,从而达到富集噬菌体的作用。PEG沉淀一般与PEG聚合程度,温度,浓度,有关。
毛利小五郎的徒弟
噬菌体扩增比琼脂糖效率高,但是操作麻烦
loveliufudan
M13KO7是常用的辅助噬菌体,可以用于构建噬菌体展示文库或进行DNA序列扩增。辅助噬菌体侵染宿主细胞后,可以利用PEG沉淀法或双层琼脂板筛选法进行噬菌体纯化和扩增。
使用PEG沉淀法进行扩增的主要优点是操作简单,不需要复杂的设备和条件,而且可以一次扩增多个样品。双层琼脂板筛选法需要耗费更多的时间和成本,但可以获得更纯净和高质量的噬菌体。