化学交联法做蛋白质寡聚化的实验有人做过吗？求指导

老师你好，请问你做出来寡聚化检测了吗，方便分享下方法吗？

出现沉淀，肯定是交联过度了。没有控制好交联的浓度，反应时间，还有得及时终止反应，你得从这几个方面优化。

蛋白电泳后，肯定是弥散的条带。单体、二聚体、三聚体、多聚体肯定都有。

化学交联很难拿到高纯度的特定聚体，应该从生物的角度去考虑。

如果你的条带有很多杂带，我感觉可能是你的抗体特异性不高。我之前做化学交联看过一篇文章挺不错，分享给你“化学交联在蛋白质结构研究中的应用”

一般可以分为In vivo 和in vitro两种情况。in vivo：用Cross－linker（such as DTSSP)处理细胞一定时间，如果你的蛋白是寡聚体形式存在，它可以把你的四聚体交联在一起，那么用不含DTT的裂解液收集细胞，然后跑胶，western，你可以看到在分子量4倍的地方有条带，设好各种对照，你可以判断出那是不是你的四聚体形式。