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免疫组化问题求助??

相关实验:免疫组化(荧光)实验

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浪子在天涯

免疫组化里面抗原修复用的100℃水浴加热法,会使组织里面的蛋白、酶等生物活性物质失活吗?为什么?

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3 个回答

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huarenqiang5

有帮助

100℃水浴加热法,一般不会导致组织里面的蛋白、酶等生物活性物质失活。沸热修复电炉或水浴锅加热0.01柠檬酸钠缓冲液(ph6.0)至95℃左右,放入组织芯片加热10-15分钟。

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毛利小五郎的徒弟

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不会的,水浴一般不会达到100度,而且是处理过的样品,所以不会失效

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loveliufudan

有帮助

在免疫组化实验中,抗原修复是为了恢复被固定处理后损失或变性的抗原免疫原性,使其可以与抗体特异性结合。常用的抗原修复方法包括热水浴加热、微波加热、酶解和酸解等,其中100°C水浴加热法是最常用的抗原修复方法之一。

在100°C水浴加热法中,组织标本会在高温下暴露一定时间,这可能会使组织中的某些生物活性物质失活,包括蛋白质和酶等。这种失活可能会对某些实验造成不利影响,例如酶活性测定等实验。

但是,通常情况下,抗原修复过程的时间比较短,加热时间一般在10-30分钟之间,且修复后的标本还需要在生物学实验中进行染色、免疫标记等处理,这些过程中可能会有更多的生物活性物质失活。因此,100°C水浴加热法对免疫组化实验中的特定蛋白质和酶等生物活性物质的失活影响相对较小,不会显著影响免疫组化实验结果。此外,不同的抗原修复方法对组织中生物活性物质的影响程度也可能不同,选择合适的抗原修复方法要根据实验需要和样本类型进行权衡。

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