RAW264.7细胞造炎症模型
z栀子花果酱
我用96孔板做过一次，每孔8000细胞，用索莱宝的LPS诱导（培养基稀释），浓度最大2.5μg/ml，分别作用12，18，24h，结果NO浓度在检测限外，怀疑是细胞数目偏少。
第二次用24孔板做，每孔30000细胞，同样索莱宝LPS诱导（培养基稀释），扩大浓度为8μg/ml，作用24h，结果同上，NO无变化。
第三次继续用24孔板做，每孔60000细胞，这次用biosharp的LPS（PBS稀释），继续扩大浓度为64μg/ml，作用4h后观察无变化。
这次用来铺板的RAW细胞状态很好，几乎没有长伪足的，都是圆圆亮亮的细胞。应该不是细胞的问题。
今天加LPS发现孔底的细胞有部分飘起，4h继续观察仍有飘起的，孔里细胞不是很多，想知道是不是这样的原因。
或者有没有其他原因造成炎症模型失败？
检测NO试剂盒是碧云天的
1 个回答
loveliufudan
根据你提供的信息，你已经尝试了三次造成炎症模型，但都没有成功。这可能是由于多种原因。
1.LPS浓度过低：在你的实验中，你使用的最大LPS浓度为2.5ug/ml，8ug/ml，64ug/ml，这可能不足以诱导细胞产生炎症反应。建议尝试使用更高的浓度，或者使用其他诱导因子。
2.作用时间过短：你在实验中使用的作用时间是12h，18h，24h，4h，这可能不足以诱导细胞产生炎症反应。建议延长作用时间。
3.LPS来源不同：你在实验中使用了索莱宝和biosharp的LPS，它们可能有不同的纯度和活性。建议尝试使用不同来源的LPS来比较效果。
4.细胞数量不足：在你的实验中，你使用的细胞数量较少，这可能不足以诱导细胞产生炎症反应。建议增加细胞数量。
5.试剂不稳定性：LPS 是一种非常稳定的试剂， 但是它的活性可能会受到温度，光线等因素的影响。建议检查试剂是否在正确的条件下保存和使用。
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