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求助体外Treg诱导的成功经验

相关实验:体外转录技术

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dxy_le38gig5

体外磁珠分选naiveCD4后,加入antiCD3/CD28,铺板后加入IL2和TGF-β,5d后CD25有表达,但比例不高,Foxp3没有表达?不清楚原因

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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

这可能有几个原因:

首先,CD25表达可能不高可能是由于刺激信号的浓度或时间不足。您可以尝试增加刺激信号的浓度或延长培养时间来提高CD25表达水平。

其次,Foxp3的缺乏可能是由于TGF-B的浓度不足或培养条件中其他关键因素的缺失。Foxp3是调节性T细胞(Treg细胞)的标志性转录因子,因此其表达的缺失可能导致Treg细胞功能的丧失。您可以尝试增加TGF-B的浓度或优化培养条件来促进Foxp3的表达。

此外,还有其他因素可能影响CD25和Foxp3的表达,如细胞源的质量和纯度,培养基组分的配方等。确保您的细胞源质量良好,并优化培养条件是解决这个问题的重要步骤。

综上所述,您可以尝试调整刺激信号浓度、延长培养时间、增加TGF-B浓度、优化培养条件以及确保细胞源质量良好来提高CD25和Foxp3的表达。如果问题仍然存在,可能需要进一步的实验设计和探索来确定原因。

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dxy_le38gig5user-title

您好,加大了IL2和TGF(50ng/ml)后,CD25表达有上升,Foxp3还是很低,请教一下还可能有什么问题影响foxp3表达。培养基用的1640+10%胎牛

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可能是加入的诱导剂的浓度不够,可以提高白介素的诱导浓度

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