外泌体提取（raw264.7细胞）

RAW264.7本身的培养也是一种原因，培养基里不加谷氨酰胺可以增加外泌体的分泌量。细胞状态好一点，外泌体含量也会多一些

您好，我目前也是在使用exoquick。但是临近毕业，这个试剂的货期比较久，已经订上了，怕来不及，所以想向您寻求帮助。如果您那边还有剩余暂时不用的exoquick试剂，能不能先借我2.5ml，我的到货之后给您还回去。

1. 超滤液量减少的可能原因：

- 过滤管堵塞：在使用超滤管的过程中，管道可能会被细胞碎片、蛋白质聚集物或其他杂质堵塞。这会导致上清液无法通过滤膜，使得超滤效果不理想。建议检查超滤管是否堵塞，必要时更换新的超滤管。

- 操作错误：超滤管的使用方法可能不正确，例如选择了错误的滤膜孔径、未正确安装超滤管等。请确保按照超滤管的使用说明进行操作，并检查每个步骤是否正确执行。

2. 外泌体浓度低的可能原因：

- 细胞上清中外泌体含量较低：在某些情况下，特定类型的细胞或实验条件下，细胞上清中外泌体的含量可能较低。这可能是由于细胞释放外泌体的量较少，或者外泌体被其他细胞组分或沉淀物所污染。可以尝试使用其他方法或技术验证外泌体的存在和浓度，例如电子显微镜观察或使用其他外泌体特异性标记物进行检测。

- 提取方法的影响：不同的外泌体提取方法可能对结果产生影响。确保您按照 SBI ExoQuick TC 试剂盒的说明进行操作，并参考相关文献中建议的步骤和方法。

- BCA 测量的限制：BCA 方法可以测量总蛋白质浓度，但不一定能区分外泌体和其他蛋白质来源。因此，低测得的蛋白质浓度可能是由于测量中存在其他蛋白质贡献或其他干扰物质的影响。您可以尝试使用其他方法来验证外泌体的存在和浓度，如 Western blotting、Nanoparticle Tracking Analysis (NTA) 或流式细胞术。

可能是温度太高了，降低温度可以提高超滤后的液体量