BMMY培养基诱导添加甲醇量的确定

建议预实验可以用多个不同浓度的甲醇:0.5%、1%、1.5%等等去诱导，每隔24h添加甲醇至初始浓度。

甲醇浓度测定有酶电极法，气相色谱法，亚硫酸品红比色法，所用仪器较昂贵，有条件可以使用。没有条件可以考虑醇氧化酶－过氧化氢酶联合酶促法。

一般取培养基1ml然后测定培养基中的甲醇含量然后再添加

可以使用高效液相色谱（HPLC）或气相色谱（GC）等方法测定培养基中剩余甲醇浓度。

具体方法如下：

HPLC法测定甲醇浓度：

a. 取样品后进行处理，例如加入内标物、蛋白酶等；

b. 使用反相高效液相色谱进行分离，使用梯度洗脱；

c. 使用紫外检测器检测甲醇的浓度。

GC法测定甲醇浓度：

a. 取样品后进行处理，例如加入内标物、酯化处理等；

b. 使用气相色谱进行分离，使用毛细管柱；

c. 使用火焰离子检测器检测甲醇的浓度。

在确定培养基中剩余甲醇浓度后，可以计算需要添加的甲醇量，以维持特定的浓度。通常可以使用线性回归法或标准曲线法进行计算。

醇氧化酶-过氧化氢酶联合的酶促反应法或气相色谱法来测甲醇的浓度。