凋亡分析处理细胞时大部分细胞都处于pi坐标的负轴是什么原因？如何处理？
丁香实验
我是做的凋亡分析，用的fitc-pi双染，由于是第一次做，对流式细胞仪机器和flowjo处理软件都不太熟悉。回来处理细胞时大部分细胞都处于pi坐标的负轴。我看文献中别人的pi都集中于正轴。我这个是怎么一回事啊？如何处理？
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18 个回答
西柚味的芋圆
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电压太低了，你做的时候一定要用单染管去调好电压
马小羊
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可能是做的时候电压没调好。尝试下folwjo中调整下坐标轴的显示情况（里面可以选坐标轴起点，线性非线性等。）
来口芝麻薄脆吗
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电压太低了，细胞都被压在下面了
zgx3876
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可能是pi的电压太低，也可能是补偿太大
peaceful13
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检查是否电压过低，导致压轴；或者是数据放大形式选择错误所导致。也有可能因为补偿过渡～没有选择双指数参数所导致
dxy_0mxazdaw
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流式电压太低了，在做单标调补偿的时候，尽量用待测细胞去做，能够确保电压的合适位置！
小破孩YG6Z
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电压太低会导致这个现象，你可以调一下pi电压
AnnaGQTP
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1.细胞的活力状态 2.坐标轴调节 3.染料是否加入过量 4.电压调节
二狗Echo
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PI在凋亡分析中主要利用其可以对核酸染色但不能透过完整细胞膜的特性，对凋亡早期和中期的细胞产生区分。 细胞都在负轴的话应考虑染料是否work、激发光的激光器是否合适（注PI-DNA最大激 发/发射波长535/617 nm）/电压是否合适？
dxy_b4qu25j6
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是不是补偿没有调好啊？还有就是电压是不是过低也可能会处于负轴
颜渊溪桥
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首先，对照要做全，不染的Blank,单染PI（55°处理的细胞）阳性对照，单染AnnexinV(诱导凋亡的细胞)阳性对照，根据对照看下补偿是否调过了； 其次，流式软件Flowjo坐标轴是可调的，尝试把Scale变成Biex，在适当调整里面的参数。
parallelgmf
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是不是电压调太低了，试试把电压升高
CXCR3
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信号出现在负轴 有可能是因为收样品时通道的激光掉了或者是收完样品后没有对数据各通道进行调补偿。如果只染两个色FITC和PE的话，这两个通道一般不会出现很大的补偿问题，考虑是不是收样时流式激光不稳定。
咸水鱼rain
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有调过补偿吗？如果电压没问题，细胞处于负轴可能是补偿的问题
dxy_4y8zumb0
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处于负轴可能是电压太小了，将电压调大。
dxy_6qpin5x4
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调整数据显示模式，一般有线性，双指数，对数模式，首先选择对数模式，然后调节电压，确保空白在左下角不压线
txs900416
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1.考虑pi的电压是否过低；2考虑fitc-pi的补偿是否太大
jiangge94
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电压调的过低导致pi都集中到负轴
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