实验室小助理夏奇
请问有师兄师姐做冰冻切片的TUNEL荧光染色吗😭😭😭可以请教一下为什么大多都用石蜡切片哇,冰冻切片是有什么弊端吗😭😭还有就是哪家的TUNEL试剂盒更好呀😭😭在线求教
huarenqiang5
主要有以下几点弊端:
1)不容易做连续切片和较薄的切片。
2)组织块在冻结过程中产生的冰晶影响细胞的形态结构及抗原物质的定位。组织结构不如石蜡切片好,切片较厚、不易得到很好的连续切片,且操作时容易破碎(易破碎的样品在冰冻前可用10%明胶或2%琼脂糖包埋)。由于组织内的水份起到包埋剂的作用,在组织冰冻的过程中,一旦冰晶的核心形成,它们就逐渐膨胀,并破坏所有围绕它们的细胞器。当冰冻的组织切片贴到玻片上时,冰晶融化,在组织上留下许多孔状的空隙。由于水在-4℃时体积大,组织内形成冰晶的数量则与组织冷冻的速度成反比,因此,要尽量避免缓慢的冷却。使组织的温度迅速降到-4℃以下,而且送检做冰冻切片的组织应尽可能地新鲜和避免过度的潮湿。用湿的盐水纱布包裹组织会使切片出现严重的人为假像及大量的冰晶孔隙,不仅造成诊断的困难,也使各种特殊要求的染色难以进行。
毛利小五郎的徒弟
冰冻切片对于细微结构显示差,只能做大致显影
loveliufudan
1. 冰冻切片的TUNEL染色:冰冻切片可以用于TUNEL染色。这种方法使用未固定的组织样本,直接将其冷冻并切割成薄片,然后进行TUNEL染色。冰冻切片的优点是快速、简便,并且对于一些抗原的保留性较好。然而,冰冻切片的主要缺点是切片质量和结构的相对较差,不适合进行细微解剖和高分辨率的显微镜观察。
2. 石蜡切片的优势:石蜡切片是将组织样本进行固定、脱水和浸渍处理后,嵌入到石蜡块中,然后进行切片。石蜡切片具有更好的切片质量和结构保持性,适合于高分辨率显微观察和长期保存。此外,石蜡切片还可以进行多种染色和分析方法,如免疫组织化学染色和原位杂交等。
3. TUNEL试剂盒的选择:TUNEL试剂盒的选择可以根据您的实验需求和研究领域来决定。不同厂家的TUNEL试剂盒可能具有略微不同的特点和性能。
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