求助RBC磷脂检测

将血液取放在加有抗凝剂的容器内，用低速离心的方法从血液中分离出红细胞，然后用等渗缓冲液重复洗涤多次，去除血浆。

将洗净的红细胞从等渗缓冲液转移到低渗缓冲液中，由于渗透压力作用于细胞质膜，使红细胞膨胀而溶血。

将溶血的红细胞经过充分反复洗涤。高速离心，去除血红蛋白和其他细胞内含物。这样制备所获得的最终产品几乎全是红细胞膜。

将试样分散于氯仿 -甲醇混合液中，在水浴中轻微沸腾，氯仿 -甲醇及样品中一定的水分形成提取脂类的溶剂，在使样品中组织中结合态脂类游离出来的同时与磷脂等极性脂类的亲和性增大， 从而有效地提取出全部脂类，经过滤除出非脂成分，回收溶剂，对残留脂类用石油醚提取，蒸去石油醚后定量。

提取细胞膜磷脂的话需要把细胞膜涨破后分离膜提取

1. 收集红细胞：使用无菌技术收集新鲜的全血样本。可使用抗凝剂（例如EDTA）抽取血液，以防止凝血。

2. 洗涤红细胞：将抽取的血液样本转移至离心管中，并加入适量的生理盐水（PBS）或磷酸缓冲液。轻轻混合，然后进行离心（约1000-1500 x g，10分钟）。倒掉上清液，避免吸入红细胞沉淀。

3. 细胞胀破：将洗涤后的红细胞沉淀悬浮于等体积的冷氯仿中。用超声波处理器或强力震荡器将红细胞悬浮液超声波处理（3-5分钟，间歇震荡）。或者，您可以将悬浮液冷冻在-80°C，然后快速解冻，重复几次。这样的冻融循环有助于破裂红细胞膜。

4. 离心：将超声处理后的悬浮液进行离心（约1000-1500 x g，10分钟）。这将分离出红细胞膜残留物。

5. 提取磷脂：将红细胞膜残留物转移到提取溶剂中，例如氯仿-甲醇混合物（2：1）或其他适合的提取溶剂。充分搅拌或超声波处理，使磷脂溶解于有机溶剂中。

6. 相分离：加入适量的盐水或其他适宜的水相溶液，将有机相和水相分离。离心以促进相分离。此过程将分离出含有红细胞膜磷脂的有机相。

7. 蒸发有机溶剂：将有机相转移至新的离心管，并进行氮气吹扫或低温浓缩，将有机溶剂蒸发至干燥。

8. 重悬磷脂：使用合适的溶剂（例如氯仿-甲醇混合物）将干燥的磷脂沉淀重悬。