coIP/抗原抗体过夜有沉淀/非特异

草丛有只大橘

2023-03-03

为什么我做coIP时，抗原抗体过夜孵育，第二天后会有絮状的，想问能不能离心取上清后再加磁珠，这样会不会损失一部分结合物。

我担心如果直接加磁珠，会使磁珠聚团，IgG组也会非特异。

（PS：抗原是经过pre-clear后加的抗体，磁珠也是封闭过的，就是很怕非特异！！！）

loveliufudan

2023-03-03

有帮助

您可以尝试以下几个方法：

优化裂解液成分和pH值

减少孵育时间和温度

在加入磁珠前离心取上清，并且在加入磁珠后再次离心去除残留絮状物

毛利小五郎的徒弟

2023-03-03

有帮助

离心取上清，不可以絮状直接做。

huarenqiang5

2023-03-03

有帮助

你这考虑是不是存在有纤维类的污染物？建议处理一下。

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