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coIP/抗原抗体过夜有沉淀/非特异

相关实验:外源性抗原向 T 细胞的呈递

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草丛有只大橘

为什么我做coIP时,抗原抗体过夜孵育,第二天后会有絮状的,想问能不能离心取上清后再加磁珠,这样会不会损失一部分结合物。

我担心如果直接加磁珠,会使磁珠聚团,IgG组也会非特异。

(PS:抗原是经过pre-clear后加的抗体,磁珠也是封闭过的,就是很怕非特异!!!)

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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

您可以尝试以下几个方法:

优化裂解液成分和pH值

减少孵育时间和温度

在加入磁珠前离心取上清,并且在加入磁珠后再次离心去除残留絮状物

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

离心取上清,不可以絮状直接做。

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huarenqiang5

有帮助

你这考虑是不是存在有纤维类的污染物?建议处理一下。

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