五更甜宝
如题。因实验计划有变,本来准备做冰切免疫荧光的,现在可能需要之前的组织做骨染色,但是已经memfa固定,蔗糖脱水,oct包埋放-80了,请问现在还能解冻再做阿利新兰骨染色么?谢谢各位了!
毛利小五郎的徒弟
可以的,短时间内负80度是没有问题的。
huarenqiang5
组织固定脱水oct包埋放在-80冰箱严格按照操作要求解冻后可以做阿利新兰骨染色。
loveliufudan
已经对样品进行了memfa固定和脱水包埋处理,如果想要使用Arlequin骨染色方法,可以尝试以下步骤:
从-80°C的冰箱中取出样品,并在室温下缓慢解冻,避免快速温度变化对组织造成损伤。
在解冻后,将样品从OCT中取出并使用PBS冲洗去除OCT残留物。
将样品再次固定,可以使用4%的中性缓冲甲醛,固定时间为至少24小时。
进行脱水和清洗步骤,最好使用渐进浓度的乙醇和清洗剂进行处理。
对于Arlequin骨染色方法,使用琥珀酸/乙醇溶液或其他适当的溶液进行脱钙化,然后进行染色。
需要注意的是,使用Arlequin骨染色方法需要更多的处理步骤和时间,而且对样品的处理要求更高,可能会对组织造成一定的损伤。因此,在进行实验前,最好在小样本上进行测试,以确定是否可以得到合适的结果。