心脏蠕动机灌注

如实验室没有专用的灌注系统，就用医院的普通的输液器即可，小鼠最好用儿童用输液器，剪开胸廓后要先剪开右心耳放血，然后直接在心尖处（针的长轴与心脏长轴基本一致）插入灌注针，开始不熟练可在升主动脉处看到灌注针（为了防止损伤心脏和血管，可将针尖磨钝），另外肝脏很快变色也是指证之一。

灌注先用生理盐水冲洗，不一定要加肝素抗凝，只要熟练后灌注效果差不多。以肝脏颜色变白为止，改灌PFA。

灌注时水位差不宜太高，约80－90厘米足够，且虽说PFA是先快后慢，但若灌注要求较高，则以小鼠的口里不吐泡沫为准，个人认为开始时80滴/分钟即可，3－5分钟后调到30－40滴/分钟维持。通常灌注半小时后即固定较好。

小鼠体内心脏蠕动机灌注的方法和用量，可以看这个文件

https://pan.baidu.com/s/1XLsNboV3YXyY7wC4l5wA-Q

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心脏蠕动机灌注的具体方法：（1）在手术之前，通过腹腔注射阿佛丁维持麻醉。（2）一旦动物到达手术所需的麻醉程度，将其放在手术盘上。（3）在肋骨下方的体表和腹壁做一个5-6厘米的侧切口。小心地将肝脏与隔膜分开。（4）使用弯曲的钝剪刀在隔膜上做一个小切口，沿着肋骨的整个长度继续隔膜切口以暴露胸膜腔。（5）沿着肋骨的一侧放置弯曲的钝剪刀，小心地移动肺部，并通过肋骨切割至锁骨。在对侧进行类似的切割。（6）抬起胸骨，仔细修剪连接心脏的组织。用止血钳夹住胸骨尖端，将止血钳放在头上。（7）将灌注针从心尖处扎入左心室，使用止血钳夹住心脏，可以固定针头并防止泄漏。（8）使用剪刀在动物的右心房切开，以尽可能大的出口，而不会损坏降主动脉。此时动物即准备好灌注。（9）灌注生理盐水至肝脏变白后换4%多聚甲醛毒继续灌注，完成灌注后，大鼠应为僵硬状态。