Dr_劉医生
1. 先将适应菌株SS1和初始菌株10700菌株接种于含50mL/L绵羊全血的哥伦比亚琼脂平板上, 平板中含有两性霉素B 200 mg/L、多黏菌素B 200 mg/L、万古霉素250 mg/L、TMP 300 mg/L.
2. 平板置于50 mL/L O2, 100 mL/L CO2, 850 mL/L N2的微需氧气体环境中37℃培养48 h后
3. 取出平板后刮取菌苔, 用8.5g/L的NaCl溶液洗涤3次以去除培养基成分和死菌, 每次离心10min,4500g、4℃, 弃上清, 保留沉淀.
小小小小小芳
1、需要有三气培养箱才可培养
2、菌种特殊,只能提供培养物和甘油种形式
3、如为培养物,收到后放4-8度冰箱,并及时使用,或者再次传代,不可久置而不用(不超过7天)
4、如为甘油种,收到后放-80度保藏,需要用时再行复苏操作。
Eason老歌迷
培养幽门螺杆菌的培养基包括非选择性及选择性两种。常用的非选择性培养基基础为脑心浸液琼脂、哥伦比亚琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂以及Wilkins-Chalgren琼脂。培养基中需加7%-10%的去纤维蛋白马血。羊血、人血、马血清、氯化血红素、淀粉、胆固醇或环糊精(cyclodextrins) 也可代替马血。选择培养基则是在上述 培养基中添加一定的抗菌药物,如万古霉素、啶酸、二性霉素B、多粘菌素B以及甲氧苄氨嘧啶(TMP)。常用的有Skirrow 配方及Dent 配方。前者原用于弯曲菌的培养,亦可用于幽门螺杆菌培养。后者为前者的改良,即将多粘菌素用头孢磺啶取代,因为少数(5%左右)幽门螺杆菌菌株对多粘菌素敏感。Drnt配方为万古霉素(10mg/L)、头孢磺啶(5mg/L)、TMP(5mg/L)以及二性霉素B(5mg/L)。有报道指出,部分菌株对啶酸敏感,因而培养基中应尽量避免作用该抗生素。