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进行免疫组化染色时,封闭液用什么血清比较好呢,这个选择跟所用抗体的来源有什么药注意的地方吗?这些选择是导致染色背景高的原因吗?
飞猪bb
最好用人的血清吧,毕竟很多酶联免疫试剂盒都是以人的为基准的。
府宅
组织中非抗原抗体反应出现的阳性染色称为非特异性背景染色,最常见的原因是蛋白吸附于高电荷的胶元和结缔组织成分上。最有效方法是在用第一抗体前加制备第 二抗体动物之非免疫血清(1:5~1:20) 封闭组织上带电荷基团而除去与第一抗体非特异性结合。必要时可加入 2%~5% 牛血清蛋白,可进一步减少非特异性染色。作用时间为 10~20min。
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封闭血清一般选择与二抗种属来源一致的血清,例如二抗是羊抗鼠igg,则封闭血清用羊血清。使用其他血清效果会差一些,可能是造成高背景的原因之一
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