最近跟着老师做实验，想咨询一下，做双向免疫扩散时用的合成抗原OVA~undefined的浓度是多少合适？如何控制才能得到最优结果？

体效价滴定：固定抗原浓度，稀释抗体；或抗原抗体双方做不同稀释医学|教育网，经自由扩散，一出现沉淀线的最高抗体稀释度为该抗体的效价。

1）血清学诊断

2）免疫化学分析：沉淀线位置主要与抗原、抗体两者浓度比例有关，沉淀线靠近抗原空，提示抗体含量高；靠近抗体空，提示抗原含量多。分子量大扩散慢，扩散圈小，形成的沉淀线弯向分子量大的一边。如二者分子量相对，则形成直线。

3）抗体效价滴定：固定抗原浓度，稀释抗体；或抗原抗体双方做不同稀释医学|教育网，经自由扩散，一出现沉淀线的最高抗体稀释度为该抗体的效价。

4）分析抗原性质

5）鉴定抗原或抗体纯度：多条沉淀线不纯

1．将已溶化的1%盐水琼脂管放58°C -60°C水浴箱中平衡温度备用。2．将载玻片置于水平桌面上，倾注已溶化琼脂3.5-4ml，使成厚度约1.5mm琼脂板（注意：倾注速度不要过快，以免琼脂溢出载玻片；倾注过程要连续以保证琼脂板均匀、平滑）。3．琼脂凝固后，将打孔模板置于琼脂板下，然后用打孔器打孔，根据不同需要可制成三角型、方阵型或梅花型。本次试验采用三角型，即每三个孔组成一个三角型。（因本次实验所制备的琼脂板均以载玻片为底板，故根据其大小只能采用三角型且每一琼脂板也只能打孔两组。否则，如采用方阵型或梅花型则因琼脂板边缘琼脂厚度不够而使周边各孔所加抗原或抗体量不足或溢出，而制成三角型三组，因各孔相距过近，抗原、抗体相互渗透扩散将影响结果的判断）。4．如图2所示，用微量加样器加10µl抗体于各组一孔中，每组所余两孔各按抗原1、2为一组，3、4为二组，5、6为三组，分别各加入10µl。注意每加一样品均需更换吸头，以防止交叉污染，影响实验结果。5．作好标记，放湿盒中，置37°C温箱，24小时后观察结果。