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请问在免疫扩散法中,根据规程最好能先将血清(抗体)样本进行补体灭活处理后再使用,如果不灭活会有什么影响呢,灭活时有什么注意事项?

相关实验:双向免疫扩散法测定抗血清效价实验

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宁静_vcgz

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3 个回答

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府宅

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如果你的实验涉及到一些其他特殊的神秘活性物质,必须要灭活,根据血清厂家多年来总结的经验,常规解冻后,40℃水浴加热20分钟即可,能够最大程度地保留营养成分。

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dxy_gwrp7ndq

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补体是一种血清蛋白质,存在于人和脊椎动物血清及组织液中,不耐热,可组成庞大的补体系统,可介导免疫应答和炎症反应。激活的补体参与溶解细胞过程,刺激平滑肌收缩、细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。如果你的实验涉及以下这些情况时,建议去除血清可能带来的补体系统的干扰。

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dxywode

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免疫扩散法:先制备含Apo抗体的琼脂糖凝胶,间隔等距离打孔,加入待测人血清,水平置于温箱(37℃)保温24或48h,抗原从孔中间向周围扩散,因凝胶板中有相应抗体,经一定时间扩散后,医学教|育网搜集整理最后在凝胶孔周围形成一圆型沉淀圈,测量其圆直径,以圆的面积大小计算血清中Apo含量。该法要求在测量圆周大小时,一定要精确到0.1mm.这一测定方法可适用于以抗体为试剂贩所有微量蛋白的测定,但易受多种因素的影响,难以测准,有淘汰的趋势。

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