凝血酶切除GST标签

小李绝不摆烂

2022-10-31

用凝血酶切除GST融合蛋白上的GST标签，获得了凝血酶和目的蛋白的混合液体，但是我实验室没有专门用来切除凝血酶的柱子，所以我想问如果就不去掉凝血酶，就用混合溶液去做细胞实验，会产生什么影响吗？

huarenqiang5

2022-11-01

有帮助

柱上酶切是推荐的方法，因为许多潜在的杂质都能被洗掉，目的蛋白洗脱时具有更高的纯度。如果直接用混合液去做实验的话可能会导致GST融合蛋白不能被有效地洗脱下来、洗脱出的蛋白不纯等等

土井挞克树

2022-10-31

有帮助

不去掉凝血酶，后续抗体结合时非常容易产生非特异性结合。影响实验结果

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