凝血酶为什么可以切割His tag ?

凝血酶可以切割带有His标签的蛋白质，但它并不是特异性地切割His标签。凝血酶的切割位点通常是Arginine (R) 或Lysine (K) 之后的Peptide Bond。因此，当His标签中存在Arginine或Lysine时，凝血酶可以将His标签从蛋白质中切割出来。

对于标准的His标签序列，通常是6个连续的Histidine残基，如His-His-His-His-His-His。凝血酶可以切割位于His标签之后的Arginine或Lysine之后的Peptide Bond，从而将His标签从蛋白质中剥离。

需要注意的是，凝血酶的切割位点不仅限于×4-×3-P-R-×1-×2的序列，这只是一种常见的凝血酶切割位点模式。凝血酶可以切割更广泛的肽键，具体切割位点取决于蛋白质的序列和结构。因此，在设计实验时，需要考虑目标蛋白质的具体序列和可能的凝血酶切割位点，以确保凝血酶可以有效地切割His标签。

凝血酶是一种广泛用于切割标签的蛋白酶，凝血酶切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',这里X4 和X3 是疏水氨基酸而X1'和X2'是非酸性氨基酸，一些经常使用的识别位点是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和M-Y-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他识别位点是X2-R[K]-X1', 这里X2 或者X1'是甘氨酸，例如A-R-G 和G-K-A，这里切割发生在第二个残基后。在凝血酶切割位点和N 末端标签之间插入五个甘氨酸残基可改善切，通过这一"甘氨酸连接肽"只需较少酶量就可达到切割，而且也可以避免可能发生的错误切割。Hⅰstag由于存在切割位点，故而可以发生切割。

凝血酶的切割位点与his tag相似，所以可以用来切割his tag