Invitrogen Mitotracker DeepRed染色求助

本人用的大鼠肺泡二型细胞RLE-6TN染的，浓度是100nM，25分钟后培养基清洗1次，400倍共聚焦显微镜镜头下是这样的，感觉不太对，像是染在了细胞膜上，我看文献和版里其他人染出来的图像上能分辨出明显的细胞核位置，而且荧光信号是低的。

下面这张图是我第一次摸条件，200nM，用普通荧光显微镜看的，貌似能看到围绕核周围有一圈高信号。

求教各位大神这是什么情况，我这个浓度该怎么调整