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要做thp-1的过表达,用脂质体转染的,但是效率非常低,有高手可以指导吗?

相关实验:细胞转染

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xiaofangzhu


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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

脂质体转染的效率可能会受到许多因素的影响,以下是一些可能有助于提高转染效率的建议:

细胞密度:在进行转染前,确保细胞密度适当。细胞密度过高或过低都可能会影响转染效率。一般来说,细胞密度应该在70%-80%左右。

转染试剂:使用高质量的转染试剂可能会提高转染效率。可以尝试使用一些商业化的转染试剂,比如Lipofectamine 3000或者PEI。

DNA浓度:确保使用的DNA浓度适当。DNA浓度过高或过低都可能会影响转染效率。建议尝试一系列浓度进行优化。

培养基:培养基中的成分也可能会影响转染效率。可以尝试添加一些增加转染效率的物质,比如Serum、Polybrene或者FuGENE HD。

转染时间:转染时间的长短也可能会影响转染效率。一般来说,建议进行16-24小时的转染,具体时间需要根据不同的转染试剂进行优化。

细胞状态:细胞状态也可能会影响转染效率。如果细胞状态不好,如受到压力或感染等影响,可能会影响转染效率。

转染温度:转染温度也可能会影响转染效率。一般来说,建议在37°C下进行转染。

质粒纯度:使用高质量的质粒DNA可能会提高转染效率。建议使用纯度高的质粒DNA进行转染。

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z流沙z

有帮助

THP1本身很难转染,建议采用慢病毒包装感染的方式

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

在转染之前更换培养基,可提高转染效率,所用培养基可37℃预温;

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