HEK293瞬转表达抗体活性偏低

你收的太晚了，瞬转一般48-72h就到表达高峰了，你提早收试试

建议优先考虑培养基或补料里是否含有抑制细胞生长的成分，有的克隆对这些成分不耐受。如果瞬转后添加补料，可以测试不同的补料的浓度。

1、瞬时转染当然是转染后2-3天左右蛋白表达量最高，之后就会下降。如果你要一直稳定表达就需要做稳转株系了，推荐定点整合，随机的话，可能会传几代后，基因还是会丢掉，导致表达量下降。
2、瞬转需要提高表达量的话，需要每次实验前，重新提质粒，然后做瞬转。瞬转的效率直接影响表达量的效率，目前主流的做法就是电转和脂质体转染。各有优缺点吧，不过293的转化应该是细胞当中比较容易转的。

建议基因优化再做表达。也可找第三方公司，他们的技术条件好，成功经验多。