蛋白组学检测到的差异蛋白为什么western blot检测不到？

蛋白组学通过质谱等技术检测到的差异蛋白在Western Blot中检测不到可能有几个原因：

1.检测灵敏度不同：

质谱等蛋白组学方法通常比Western Blot更敏感，能检测到低丰度的蛋白。

2.靶蛋白特异性：

Western Blot依赖特异性抗体识别目标蛋白，如果抗体对该蛋白的识别性不好或者抗体质量问题，可能导致检测不到。

3.蛋白修饰和变体：

某些蛋白在体内可能经过翻译后修饰或存在不同的剪接变体，这些变化可能影响Western Blot中抗体的识别。

4.质谱与Western Blot的分辨率差异：

质谱具有更高的分辨率，可以区分非常相似的蛋白质，而Western Blot可能无法做到这一点。

因此，当蛋白组学检测到的差异蛋白在Western Blot中检测不到时，需要综合考虑上述因素，并可能需要优化实验条件或采用其他方法进行验证。

靶蛋白分子量小于 10 000，标本中靶蛋白含量太低

这就原因很多了，抗体不行，转膜没转上，没封闭好等都有可能，你得说出具体哪一步开始，比如你电泳后有把蛋白拉开吗？从前往后排除，蛋白组学检测到了，一般本身就是表达的，应该就是后边操作的原因

1.样本中所含目的蛋白表达量过低或无表达；

2.Western Blot蛋白提取时降解；

3：蛋白样本保存条件不合适，蛋白降解；

4：蛋白转膜效率低；

5：一抗二抗检测体系不匹配；

6：抗体失活；

7：显影液使用时间过长。

WB检测不到目的蛋白的原因有很多，例如目的蛋白表达量较低，可以适当提高上样量，或提高一抗孵育浓度；也可能跟抗体有关，可以考虑换一家的一抗试一试

可能是浓度不够的原因，达不到最低检测浓度