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为什么跑完蛋白总是靠近浓缩胶这一半胶脱不了色

相关实验:蛋白质凝胶电泳凝胶的制备

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dxy_olfpaug9


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4 个回答

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huarenqiang5

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考虑胶的浓度过高,建议降低浓度。

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feixue7758527w

有帮助

你的loading buffer太多了,适当稀释减少用量看看的。

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小小翻车鱼

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在凝胶电泳中,蛋白条带靠近浓缩胶这一半胶脱色不充分可能有以下原因:

1. 脱色液问题:

a. 脱色液未覆盖胶:确保脱色液完全覆盖凝胶,以便充分接触到所有蛋白条带。

b. 脱色液不足:根据凝胶体积和厚度,确保使用足够量的脱色液。脱色液不足可能导致脱色不完全。

c. 脱色液变质:长时间使用或保存不当的脱色液可能导致脱色效果降低。定期更换脱色液,并妥善保存。

2. 凝胶问题:

a. 浓缩胶与分离胶之间未充分融合:确保电泳过程中凝胶充分融合,以防止出现空隙。

b. 凝胶厚度不均匀:确保凝胶的厚度均匀,以防止脱色液无法充分渗透到凝胶的每个部分。

c. 浓缩胶比例不合适:根据目标蛋白的分子量,选择合适的浓缩胶比例。浓缩胶过薄可能导致部分蛋白无法被浓缩。

3. 电泳条件问题:

a. 电压过高:过高的电压可能导致蛋白过快通过凝胶,使脱色液无法充分脱色。降低电压,并确保电泳时间充足。

b. 电泳时间不足:确保电泳时间足够长,以便蛋白充分迁移并通过凝胶。

c. 凝胶缓冲液不适当:选择适当的凝胶缓冲液,以使目标蛋白具有良好的迁移效果。

4. 脱色过程问题:

a. 脱色时间不足:确保脱色时间足够长,以使脱色液充分作用于蛋白条带。

b. 搅拌不充分:在脱色过程中定期摇晃或搅拌脱色液,以使脱色液与凝胶充分接触。

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周末也要努力呀

有帮助

loading太浓了,你是几✖️的loading?需要稀释

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