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是loading buffer出了问题还是胶出了问题?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_5690cfnq

最近两次跑电泳都是这样,感觉没有压的很齐,之前loading buffer都是压成一条线一起跑的,这次不知道为什么这样了?是loading buffer出了问题吗?还是胶出了问题,loading buffer是最近新配的。


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11 个回答

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dxy_kqm3zpd0

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感觉是有漏液,导致两边电流不稳定

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feixue7758527w

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你可以继续下面的实验看看,如果后面显影后还好,就是loading buffer出问题了。如果后面显影也不行,就是下面的胶不行的。

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marklily

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请问是Western Blot实验吗?

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土井挞克树

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胶的可能性更大,压胶没有压齐。

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huarenqiang5

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从图片上来看主要考虑是胶的问题。

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粥辰辰辰辰

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重新配胶,有时胶未混匀和没凝好,会出现这样的问题。

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此用户已注销

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看看配制有没问题,另外跑胶的时候注意有没有漏。

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zjcxchentian

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有没有可能是你每个泳道所加的蛋白量或者体积差别过大

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周末也要努力呀

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loading过稀,胶没有混匀,还有上样量是不是太少?都会影响

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balalaLy

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压缩效果主要跟loading buffer中巯基乙醇有关。跟胶没有多少关系。另外不一定要完全压成一条线

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高山云初

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可能是电泳时间不足导致 marker 只跑了一半。在 Western电泳的过程中,marker和样品需要一定的电泳时间才能完全分离。如果电泳时间不够,marker可能只跑了一半,而样品仍然停留在凝胶的顶端。如果凝胶质量不佳,也可能会导致 marker 只跑了一半。可能是凝胶浓度、pH值、聚合时间等方面出现了问题。在这种情况下,需要重新制备胶。

 

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