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最近纯化了一个病毒的3个不同蛋白A,B,C,分别去免疫小鼠,elisa检测血清时发现,包被A蛋白后和A,B,C血清都能反应

相关实验:ELISA 实验

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是毛妮呀

最近纯化了一个病毒的3个不同蛋白A,B,C,分别去免疫小鼠,elisa检测血清时发现,包被A蛋白后和A,B,C血清都能反应,同样包被B蛋白和A,B,C血清也都能反应,包被C蛋白也是同样的情况,疯了,哪位大神知道啥情况吗???

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5 个回答

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loveliufudan

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这种情况通常是由于不同蛋白之间存在交叉反应所致。即小鼠体内在接种A蛋白时,不仅产生了抗A蛋白抗体,还同时产生了抗B、抗C蛋白的抗体。B、C也同理,所得血清都含有对A、B、C的抗体。这种交叉反应可能是由于这三个蛋白有一定的相似结构域所致。在纯化过程中也可能有少量其它两种蛋白的混入,导致小鼠体内产生多种抗体。你可以试试纯化这三种蛋白的特异性单克隆抗体,再进行ELISA,可能会观察到更高的特异性。

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毛利小五郎的徒弟

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有可能是蛋白之间存在混合污染,也就是蛋白纯化不足导致的交叉反应

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学习是为了少犯错

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有很大的可能是纯化的时候污染了。

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是毛妮呀user-title

请问怎么分析蛋白有没有相互污染

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feixue7758527w

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我觉得两个方面可能出问题的,一个就是纯化的时候是否有污染的情况,一个就是包被的时候是否完全,包被过程是否有问题的。

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是毛妮呀user-title

请问包被的时候是否包被完全是啥意思

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汤姆卜丽波

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我觉得只能说明你的纯化过程出问题了,有交叉污染

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是毛妮呀user-title

3个蛋白不是同时纯化的,应该不会污染

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