蛋白质电泳的loading buffer中甘油含量会影响分子量结果吗？

Buffer里边的成分甘油可以加大样品密度，使样品密度大于TAE，从而沉降到点样孔中，防止样品飘出点样孔，一般不会影响结果。

蛋白质电泳loading buffer中甘油含量一般情况下不会影响分子量结果。

是的,loading buffer中的甘油含量不同会对蛋白质SDS-PAGE电泳的分子量结果产生影响。

主要原因有:

1. 甘油含量高会增加样品的粘性,影响蛋白质在胶内的迁移率。

2. 高粘性样品进入胶体堵塞胶孔时会产生堵头效应,使样品扩散变慢。

3. 甘油可与SDS结合,高甘油会与更多SDS结合,降低SDS与蛋白质的结合,影响蛋白质负电荷。

4. 甘油还可影响蛋白质的热变性和展开。

所以同一蛋白样本在高低甘油条件下,其迁移速率会有差异,从而影响分子量的估算。这种影响程度与蛋白本身性质也有关。

解决方法是尽量保持不同样品loading buffer中甘油浓度一致,这样其影响会在各样本间抵消。也可以降低甘油含量到10-20%为宜。