脂肪组织单细胞悬液制备

按以下几点建议来提高细胞获得率:

1)将获取的脂肪组织清洗后剪碎，加入1~2倍体积的消化酶进行消化;

2)第一次消化结束后对步骤1)所得的组织悬液进行离心，抽取下层消化液和细胞的混悬液，加入等体积的终止液中和消化酶的作用，得到悬液a，上层夫消化的组织块继续加入1~2倍体积的消化酶对组织块进行第二次的消化;

3)在第二次消化后，将未完全消化的组织

块，第二次消化所得的消化液和细胞的混悬液，以及悬液a，全部加入放置了细胞筛网的培养皿中，进行手工柔和研磨，吸取研麽后的细胞悬液，加入等体积的终止液。

下面是一些可能有助于提高脂肪组织单细胞悬液制备的建议：

1. 脂肪组织预处理：在开始消化之前，确保脂肪组织样本经过适当的预处理。这包括去除周围的结缔组织和血管，并尽量去除可见的血液。

2. 酶消化条件优化：消化条件是关键因素之一。您可以尝试优化消化时间和消化酶的浓度。对于L型胶原酶，您可以尝试不同的消化时间（例如15分钟、30分钟、60分钟）和酶浓度，以找到最适合您的样品的条件。

3. 细胞分散：在消化结束后，进行细胞分散以制备单细胞悬液。轻轻振荡或轻柔离心来帮助分散细胞，避免过度机械刺激。

4. 过滤：使用细胞筛或滤网（例如70μm或100μm）过滤细胞悬液以去除大块组织碎片。

5. 细胞沉降：将过滤后的细胞悬液放置在离心管中，进行适当的离心以促进细胞沉降和去除上清液。

6. 细胞计数和质量评估：使用显微镜和细胞计数仪等工具对细胞进行计数，并评估细胞的质量和完整性。