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一般是吸取上清的,需要超声破碎的
土井挞克树
取上清,沉淀一般是当作废料处理
loveliufudan
在用甲醇诱导的毕赤酵母转化子中,通常需要采取一系列步骤来收集目标蛋白。以下是一般的实验流程:
1. 收集上清液:在甲醇诱导后,将培养基离心,收集上清液,其中包含目标蛋白及其分泌产物。上清液中的蛋白质可以用于后续分析或纯化步骤。
2. 破碎细胞(可选):根据实验需求,你可以选择对毕赤酵母细胞进行破碎。破碎细胞的方法包括超声破碎、高压破碎、球磨破碎等。这些方法可用于释放细胞内的目标蛋白,并增加蛋白的可得性。
3. 离心沉淀:如果你需要分析或纯化目标蛋白的细胞内部分,可以将细胞沉淀下来。将培养基离心,去除上清液,然后收集细胞沉淀。细胞沉淀可以用于后续的蛋白质提取、纯化或进一步分析。
关于是否需要超声破碎,这取决于你的实验目的。超声破碎可以有效地破碎细胞壁,释放细胞内的蛋白质,从而增加目标蛋白的得率。如果你希望获得更高的目标蛋白产量或需要进一步研究细胞内部分的蛋白质,超声破碎可能是一个有用的工具。然而,具体是否需要超声破碎还要根据实验要求和具体的研究设计来确定。
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