在ELISA定量检测实验中，如何选择合适的检测二抗？

根据实验要求的特异性进一步筛选二抗

Anti-IgG (H+L)是最常用也是性价比最高的二抗形式，这类抗体和IgG分子的重链和轻链都可以反应，也可以和其他的免疫球蛋白家族（IgM，IgA，IgD,IgE）和亚家族反应，因为所有的免疫球蛋白都有相同的轻链。 Anti-IgG，Fc fragment specific这类抗体和IgG重链的Fc部分反应，与F(ab’)2或Fab无交叉反应，但可能与IgM或IgA有交叉反应；而抗IgG，Fcγ fragment specific则只与IgG重链反应，通常不能和IgA或IgM任何表位反应。 Anti-IgG，F(ab’)2 fragment specific则与Anti-IgG，Fc fragment specific则正好相反。

在选择合适的检测二抗进行ELISA定量检测时，可以考虑以下几个因素：

1. 目标分析物和样本来源：确定您要检测的目标分析物是什么以及样本的来源是什么（例如血清、细胞上清等）。根据目标分析物的种类和性质，选择具有良好特异性的检测二抗。例如，如果目标是人的蛋白质，您可以选择抗人的特异性二抗。

2. 特异性和交叉反应：确保选择的检测二抗对目标分析物具有高度特异性，并且不会与其他非特定抗体发生交叉反应。这有助于提高测定的准确性和可靠性。

3. 标记物：选择适当的检测二抗标记物。最常用的标记物是酶（如辣根过氧化物酶-HRP）或荧光染料（如荧光素酶、碱性磷酸酶等）。确保所选择的标记物能够稳定、灵敏地检测并产生可测量的信号。

4. 可用性和商业供应：考虑检测二抗的可用性和商业供应情况。确保所选择的二抗易于获取，并且有可靠的供应商提供。

5. 文献支持和优化实验：查阅相关文献，了解其他研究者在类似实验中所使用的检测二抗。根据文献中的建议和经验，进行优化实验，选择最适合您实验条件和目的的检测二抗。

一般来说，选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑：

【一抗的种属来源】

二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。艾美捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗，包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。

【一抗的类别亚型】

二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下，可以选用抗相应物种IgG。艾美捷能为您提供通用的IgG（H+L）二抗，或者特异性只结合IgM的Anti IgM （mu） Antibody、IgA的Anti IgA （alpha-Antibody、IgE的Anti IgE （epsilon） Antibody等。