dxy_w0jtmb0w
有没有老师同时跑P16和P21啊 内参是GAPDH 想问问电泳和转膜条件 跑的时候P16挺成功的 但是P21一直出不来
我是上层胶80V跑出红色marker 然后转120V 等marker散开 停止电泳 转膜是恒流300mA 30min 封闭1小时 一抗4度过夜 二抗室温摇床1小时
是TTT
如果一起转膜的条件下只有p21跑不出来,可以考虑换一个细胞系试一试;如果还是不行很可能是一抗不行
dxyc42u
像是转膜的问题,减小电压延长时间试试
毛利小五郎的徒弟
P16如果没有问题的话,考虑电泳和转膜条件没有问题,可以适当延长一下转膜时间。
FrEShAIFE
p21分子量比较小,建议你可以采用过夜转膜的方法,比如说45伏转膜15h。marker分开前可以用65v电泳。
balalaLy
其它抗体都出来了,而且p21的分子量不大也不是特别小,电泳和转膜应该没有问题,优化一下抗体的条件吧。
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