实验室小白10086
刚刚接触中和ELISA,板上有10列样本血清以及阴性和阳性血清,倍比稀释计算样本血清的抗体效价。在临床中,一块ELISA板只能这样检测10个动物血清中抗体的效价吗?
ELISA的PI计算中,使用的样本血清的OD450值是哪一个呀?样本血清在板上不是被被稀释了吗?怎么计算呢?SOS
sswei
一般来讲,96T能检测90个样本,48T能检测42个样本,这里面需要用标样来做标准曲线。5个标准曲线和1个空白孔!
当然为了提高实验结果的准确性,还是推荐选择做双标曲,这样,96T能检测85个样本,96-(undefined2+1)=85,同理,48T能检测37个样本。
毛利小五郎的徒弟
样本在稀释前可以进行od值测量的,然后还要绘制标准曲线。
loveliufudan
在ELISA实验中,一块ELISA板通常可以同时检测多个样本血清中的抗体效价。每个样本血清通常在不同的孔中进行稀释和测量。
对于倍比稀释计算样本血清的抗体效价,一般会选择一列作为起始稀释(通常为1:10或1:100),然后进行一系列的倍数稀释,如1:10、1:100、1:1000等。这样可以在不同孔中检测不同稀释倍数的样本血清,并根据检测结果来确定抗体效价。
在ELISA中,通常使用OD450值来表示样本血清中的抗体反应强度。OD450值是在ELISA阅读器中测量的光密度值,用于表示试验孔中所吸光的程度。一般情况下,样本血清会在某种程度上被稀释,但测量时通常会选择适当稀释倍数的样本,使其在检测范围内,既不过低导致信号弱,也不过高导致信号饱和。
计算抗体效价时,通常会选取OD450值在一定范围内的线性部分进行计算。这个范围的确定可能会因实验设计、实验目的和样本特性而有所不同。常见的计算方法包括使用曲线拟合法、半最大抗体效价法等。
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