wb无条带求助

一般内参抗体很少出问题，内参不出条带可能是位置不对，或者二抗种属不对。其次，抗体孵育使用的buffer，比如抗体稀释液或者TBST的 ph过高。

1.转模板不平整，在内参的位置结合不紧密，导致内参蛋白没有完全转到膜上，可换平整的板试一试；2.抗体结合力较差，换个批次或者公司的试剂试一试；3.转膜时间不够或者过长，导致内参蛋白没能完全转到膜上或者转出膜外，

如果内参蛋白在你的实验中没有显示出条带，可能是由于以下几个原因：

1. 组织/细胞提取的问题：内参蛋白在不同的组织或细胞类型中的表达水平可能不同。确保你使用的组织/细胞提取方法是适用于你的样品类型，并且蛋白提取过程中没有发生明显的问题，例如蛋白质溶解不彻底或蛋白质被降解。

2. 蛋白负荷量的问题：内参蛋白的信号应该在蛋白负荷范围内处于线性响应区域。如果你加载的内参蛋白量过高或过低，可能会导致信号过强或过弱而无法观察到清晰的条带。尝试调整内参蛋白的加载量，使其处于合适的线性响应范围。

3. 抗体问题：确保你使用的内参蛋白抗体的特异性和有效性。可以尝试使用不同来源或批次的抗体，或者与其他研究人员讨论他们在相同条件下使用的内参抗体。

4. 实验条件问题：检查实验条件是否正确。例如，是否正确运行电泳和转膜步骤，是否使用正确的电泳和转膜条件，是否正确选择和稀释抗体，以及是否正确进行染色步骤等。