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血管平滑肌细胞膜片钳实遇到的问题求助

相关实验:血管形成实验

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dxy_zqos6am4

我是个做膜片钳的新手,我最近在做急性分离的血管平滑肌细胞膜片钳实验,我遇到的问题就是行成高阻封接后破膜,只要一破膜细胞就收缩,或者是破膜是细胞没有变化,过了一会细胞就开始收缩了这是我按照文献中配置的电极内外液,我想记录的是平滑肌细胞BKCa通道电流,钳制电压为-70mv,就是破膜后总是收缩,还有就是我配完了内外液测渗透压,外液渗透压显示270~280,内液渗透压250~260,这个范围我想问平滑肌细胞内外液渗透压是多少,我这个正常吗?谢谢各位大佬的指教

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2 个回答

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loveliufudan

有帮助

您遇到的问题可能是由于以下原因导致的:

细胞质溶液中的Ca2+浓度过高:高浓度的Ca2+会刺激平滑肌细胞收缩,因此需要控制细胞内外液中的Ca2+浓度,确保在实验过程中细胞不会受到过多的刺激。

钳制电压过大:过大的钳制电压也可能导致平滑肌细胞收缩,因此需要逐渐调整钳制电压,找到合适的电压范围。

内外液渗透压差异过大:内外液渗透压差异过大也可能导致细胞收缩,因此需要逐渐调整内外液的渗透压差异,确保在实验过程中细胞不会受到过多的刺激。

关于平滑肌细胞内外液渗透压的问题,正常情况下,平滑肌细胞内液渗透压约为280-290 mOsm/L,外液渗透压约为290-300 mOsm/L。您提供的内外液渗透压差异在正常范围内,但在进行实验时,需要根据具体实验条件和实验目的来确定合适的内外液渗透压。一般建议将内外液渗透压调整到接近等渗状态,以减少细胞在实验过程中受到的刺激。

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土井挞克树

有帮助

一般渗透压是280-320,可以调整一下渗透压再做

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