使用PLA检测蛋白质互作时需要对细胞进行通透处理吗？

在使用PLA（Proximity Ligation Assay）检测蛋白质互作时，通常需要对细胞进行通透处理。这是因为细胞膜的存在可能会阻碍探针的进入，影响检测结果的准确性。

常见的细胞通透处理方法包括甲醛或乙醛固定、冰乙酸/乙醇洗涤、Triton X-100或Digitonin等洗涤剂的处理，以及其他一些化学或物理方法。这些方法不仅可以通透细胞膜，还可以保持蛋白质的空间结构和互作关系，从而提高PLA检测的准确性和特异性。

但是，对于一些特殊的蛋白质或细胞类型，可能不需要进行通透处理，或需要进行不同的处理方法。因此，在进行PLA实验之前，需要根据实验的具体要求和样品特点，选择合适的细胞处理方法，以获得更准确和可靠的检测结果。

需要通透处理的，可以用含0.5%Tritonx100的pbs处理10-15min，然后再加入封闭液孵育

经过 4% 多聚甲醛固定后，可以使用0.2% TritonX-100透化。