western blot 可以同时加两种同种属的一抗

一般来说应该按不同蛋白分子量大小裁膜，孵育不同抗体，或者蛋白大小比较接近就先孵一个抗体，显影完成后再用一抗去除液洗掉孵另外一个抗体。不建议两个抗体同时加到一起。

最好不要同时加，因为如果出现非特异性结合的话是很难判断的

Western blot 是一种常用的蛋白质检测技术，可以同时检测多个蛋白质，但是在使用同种属的一抗时需要注意一些问题。

同种属的不同蛋白质在结构上可能存在一定的相似性，因此同种属的一抗可能会交叉反应，并导致非特异性的检测信号，从而影响实验结果的准确性和可靠性。因此，为了避免交叉反应，通常建议使用不同种属的一抗来检测不同的蛋白质。

如果需要同时检测同种属的不同蛋白质，可以使用以下几种策略：

采用间接法，即在不同的蛋白质上使用不同的二抗。例如，如果要同时检测同种属的两个蛋白质 A 和 B，则可以使用两个来自不同种属的一抗，例如兔抗A和鼠抗B，然后在A和B上分别使用来自兔和鼠的二抗进行检测。

通过选择不同的区域或表位，来避免同种属的一抗的交叉反应。例如，如果要检测同种属的两个蛋白质 A 和 B，可以选择不同的区域或表位的一抗，例如兔抗A的N端和兔抗B的C端。

在同一实验中分开进行检测。例如，可以在同一实验中先检测蛋白质 A，然后再洗膜后再进行蛋白质 B 的检测。

总之，为了保证实验结果的准确性和可靠性，建议在使用同种属的一抗时，需要根据实验设计和具体情况，综合考虑上述策略来选择合适的实验方案。